香蕉根系丛枝菌根(AM)真菌染色方法

1. 取保存于50%酒精中的香蕉根系，用清水冲洗干净，并将水分控干。将香蕉根系剪成约 25px 长的根段，置于组织包埋盒中。

2.透明: 加入 20% KOH 溶液完全浸泡根系， 90℃水浴 15 min (除去根部皮层细胞的细胞质, 有利于染料的侵透)后，清水冲洗 3~5 次并将水分控干。

3.脱色: 加入碱性H₂O₂室温脱色1.5h，除去深色根系表层的颜色，同时软化根系。脱色结束后用清水冲洗 3~5 次并将水分控干。

4.酸化:加入5%的冰乙酸，室温酸化5 min。

5.染色:加入派克标准纯黑墨水配置的5%的墨水醋染液 (5%冰乙酸95mL+墨水5mL); 放入66 ℃的水浴锅中水浴染色30 min。

6.褪色:染色完成后，倒去染液，并用清水漂洗数次后，在清水中脱色(时间为>12 h)。

7. 将脱色根段置于载玻片上，挑出根中的坚硬组织，将剩余组织平展在载玻片上，每片平行摆放 2 个根段，盖上盖玻片，用镊子轻轻敲压使根段平展均匀。每种染色剂处理的根段制片 3 张，重复3 次。使用尼康 MODEL ECLIPSE Ci-L、DS-Ri2 显微镜观察、拍照。

参考文献：香蕉根系丛枝菌根（AM）真菌染色方法比较.pdf

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• 香蕉根系丛枝菌根_AM_真菌染色方法比较_覃晓娟.pdf