取完整的生姜根系,用自来水冲洗干净,滤纸吸干水。将根系剪成2 cm 长,加10% KOH溶液完全浸泡根系,90 ℃水浴10 min 后用自来水轻轻冲洗3次。用10% H2O2脱色3 h后用自来水冲洗3次。加2% HCl溶液室温酸化20 min,去掉 HCl溶液,用自来水轻轻冲洗3 次。染色:用5% 醋酸墨水(5%乙酸95mL+墨水5mL),放入66 ℃的水浴锅中水浴染色30 min。染色后的根段放在水中保存。
制片与显微镜观察:挑取脱色处理后的根段于载玻片上,每片平行摆放4个根段,加2~3滴乳酸于根系使起褪色作用,盖上24 mm×50 mm盖玻片,用手指将根段稍用力压扁。使用奥林巴斯BX53-32p02显微镜观察和拍照。
参考文献:5种染色剂对生姜根系丛枝菌根(AM)真菌的染色效果比较.pdf