AM真菌形态鉴定方法

采用湿筛倾析法筛取孢子。在体式显微镜下，用移液枪吸取孢子悬浮液中外表健康的孢子100个以上至盛有无菌水的表面皿中，除去孢子表面上的杂质（菌丝和碎屑）。先在体视镜下察看记录孢子的具体形态（颜色、大小、连孢菌丝的特征、孢子果形态等）；吸取孢子于载玻片上，在Nikon Eclipse Ci-L生物显微镜下观察并逐个测量100个孢子的大小（长度和宽度），取些许孢子加浮载剂（如水、PVLG）分别制片，然后观察记录孢子的形状、颜色、表面纹饰，孢子内含物、连孢菌丝的数目、宽度及形状、孢壁结构，辅助细胞（土生泡囊），外生菌丝及附属结构产孢子囊等特征。辅助使用Melzer’s 试剂、乳酸酚棉蓝、PVLG+ Melzer’s试剂1:1制片，观察与孢壁发生的特异性反应，观察孢壁层次及各层颜色，测量孢子壁的厚度，将具有代表性的或特异性的特征进行拍照。根据以上观察到的孢子的形态特征采用Schü?ler & Walker（2010）的分类系统，并参阅Schenck & Perez（1988）、《中国丛枝菌根真菌资源与种质资源》与国际网站(http: //www. amf- phylogeny. com)的分类描述，参照“VA 菌根鉴定手册”(Schenck&Perez, 1988)和国际 VA菌种保藏中心(International culture Collection Center of Vesicular and Arberscular Mycorrhizal Fungi, INVAM)(http://invam.caf.wvu. edu)；http://www.zor.zut.edu.pl/Glomeromycota/Taxonomy.htm（Department of Plant Pathology, University of Agriculture in Szczecin,Poland）上提供的描述和图片，并查阅相关种的原始发表和近几年发表的有关AM真菌的分类资料进行种属的检索和鉴定。对于难确定的种或可能的新种、新记录种进一步进行单孢培养，获得大量的同源孢子，再确定种类，部分种类采用分子生物学方法辅助鉴定。AM真菌孢子以Melzer's : PVLG = 1 : 1或PVLG为浮载剂制成玻片标本，密封、编号、并进行贮藏。